目前，光学显微镜在当代的应用可谓是越来越广泛，通过对上一遍文章的了解，我们也大致已经对光学显微镜多多少少有所了解了，现在我们就继续来深入了解光学显微镜，关于光学显微镜的透射光相差法、光学显微镜的基本部件、光学显微镜的透射光调整方法、光学显微镜的适用范围、光学显微镜的微分干涉调整方法、光学显微镜的落射光激发荧光法、光学显微镜的荧光法调整方法。
光学显微镜
光学显微镜的透射光相差法：
这是现代显微镜检术中的一种反差增强法。
光学显微镜的基本部件：
相差物镜、明视野与相差兼用的多用途聚光镜、对中望远镜、绿色滤光片。
光学显微镜的透射光调整方法：
a. 在库勒照明系统调整好的基础上，用明视野方法把样品调焦清晰
b. 把聚光镜转到Ph1对准转盘刻度线位置，选用10×相差物镜，换上待观察的透明样品
c. 拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，并调焦于视野中的两个相差环上（物镜的黑色相差环和聚光镜的透光相差环）
d. 视野中的两个相差环不一定重合，调节聚光镜上的两个调节装置（调整相差环左右位置的调节杆和调整前后位置的摩擦式转钮），使透光环作前后左右移动而与黑环重合
e. 调整好后，换回观察用目镜，将绿色滤光片按入光路中，即可观察到样品的相差像
f. 有20×和40×物镜观察时，聚光镜应设在Ph2位置上，用100物镜时，聚光镜应设在Ph3位置上。
光学显微镜的适用范围：
适用于观察透明、未染色或不能染色的样品，如各种细胞、活组织、未染色或不染色的组织切片、水生生物等。
光学显微镜的微分干涉相衬法：
为了克服相差法观察时样品细节像周围伴随有光晕，会掩没掉本来应该看见的细节，以及样品或组织切片厚度要求相当薄，原则上下能厚于10?m等局限性，利用双光束干涉的原理设计子微分干涉相衬法。
光学显微镜的微分干涉调整方法：
a. 必须在库勒明系统已调好的基础上才能调好DIC方法
b. 先用10×物镜，以明视野先确定好能把样品看清晰的物镜调焦位置
c. 把起偏器（polarizer）摆入照明光路中，注意其取向应为东—西方向
d. 把聚光镜转盘转到与10×物镜对应使用的位置上，即DIC 0.3—0.4
e. 在物镜后方或物镜转换器上插入10×物镜使用的DIC插片（DIC slider）
f. 把检偏器（analyser）插入成像光路中，注意其取向应为南—北方
g. 换上待观察的透明样品，开亮光源把样品调焦清晰
h. 调节DIC插片，使微分干涉相衬的像达到最佳效果，也就是浮雕效果最为明显
i. 同时可调节聚光镜的孔径光阑，使反差的效果也达到最佳
j. 然后再细微调样品的细节，可见样品中不同层面上的结构
k. 如果把补色器（first order red retardation plate）插入，并同时调节DIC插片，可在视野中看到不断变化的绚丽色彩，红、橙、黄、绿、蓝、紫、粉红、粉紫及金黄色都具有。适用范围：透明或不能染色的组织切片，厚度可达100?m左右，培养中的活组织和活细胞、小生生物等。
光学显微镜的落射光激发荧光法（incident-loght fluorescence Epi-FL）：
简称为落射荧光法，是近代显微镜检术中新发展出来的一种强有力的反差增强法。
光学显微镜
它将激发荧光用的光源改在物镜的上方，光由物镜上方经反光镜射入物镜去激发样品，从样品上被激发的荧光经物镜成像并穿透反光镜而由目镜观察。
该方法较简便，效率高，50W的光源强度比透射荧光法的250W还强。荧光方法是利用波长较短的紫外光、紫光、蓝紫光、蓝光及绿光等去激发样品，只要样品中含有可产生荧光的成分，它便吸收短波的激发光而释放出波长较长的荧光。不同物质只能吸改特定波长的激发光，而释放的荧光也会有特定的波长，因而用作特异性的鉴定十分有效，如某些致病的细菌和螺旋体，受紫外光激发后能发出它们特有的荧光，很容易作出鉴定，这种利用物质吸收激发光后放出特有荧光的方法称为自发荧光法。某些物质自身不会吸收激发光，或吸收后不能释放荧光，但可以吸收或吸附特定的荧光色素或染料，而这些特定的荧光色素或染料也只能吸收特定的激发光，再释放出特定的荧光，从而间接地鉴别出某种物质，这称为间接荧光法。上述荧光方法广泛应用于医学、生物学及工业的特异性研究和鉴别上。
光学显微镜的荧光法调整方法：
荧光显微镜或附有荧光部件的显微镜，调整的方法大致相同。
本文我们为大家深入讲解了光学显微镜的透射光相差法、光学显微镜的基本部件、光学显微镜的透射光调整方法、光学显微镜的适用范围、光学显微镜的微分干涉调整方法、光学显微镜的落射光激发荧光法、光学显微镜的荧光法调整方法。希望对有需要的读者有所帮助。
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